产品货号：
KD2076
中文名称：
非变性PAGE制胶及电泳试剂盒(常规蛋白)
英文名称：
Non-denatured PAGE Gel Preparation Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
保存：2～8℃
产品组成：
注意：
1.过硫酸铵(APS)为结晶性粉末，2～8℃储存，使用前每支加入1mL蒸馏水即为10% APS溶液，现配现用最佳，溶液用后-20℃可储存2个月。APS如出现严重结块，即已变质。
2.将5×tris-甘氨酸电泳缓冲液(干粉)加入到900mL的蒸馏水中，搅拌溶解之后，定容到1L，即得5×电泳液，常温可保存半年。使用前用蒸馏水稀释到1×。
产品简介：
本试剂盒提供非变性PAGE凝胶制备以及电泳全套试剂。可以根据需求配制各种浓度的非变性分离胶，同时提供4×非变性蛋白上样液(需-20℃保存)和5×非变性电泳缓冲液用以满足不同分子量的酸性蛋白电泳实验，无需再准备试剂，使用方便，经济实惠。如需小量制备多种浓度变性分离胶请选购KD3030产品。
操作步骤：(以0.75mm厚mini胶为例)
一、灌制分离胶
1．参照凝胶模具说明书，装配好模具。
2．取相应体积的30% Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水(参照表1)在小烧杯或试管中混合。
3．加入10% APS溶液和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．注入模具(留少许以判断凝胶状态)，避免产生气泡，凝胶混合液加至距前玻璃板顶端约1.5cm或距梳齿0.5cm，轻轻加入1mL水覆盖封胶，使分离胶表面保持平整。
5．静置30～60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶
1．倒掉覆盖在分离胶上的水层。
2．将相应体积的30% Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和双蒸水(参照表2)在一个小烧杯或试管中混合。
3．加入10% APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．将浓缩胶溶液加至分离胶的上面(留少许以判断凝胶状态，避免产生气泡，直至前玻璃板的顶端。
5．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
6．静置30～60分钟，待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，避免破坏加样孔。
7．进行常规电泳操作。使用Tris甘氨酸电泳液建议电泳条件：初始电压80V，约30分钟，样品进入分离胶后，电压调至120V，约1小时，样品抵达凝胶底部停止电泳。
注意事项：
1.APS溶液常温不稳定，取用后立即放回-20℃冰箱；若发现凝胶时间延长，应更换APS溶液。
2.PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关；可通过增加50%～100%的APS及TEMED的用量，加快PAGE凝胶的聚合速度，但凝胶聚合过快不利于操作。
3.在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
4.在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水时速度不能太快。
5.丙烯酰胺具有神经毒性，操作时请穿戴实验服和一次性手套。
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